AD乙胺碘呋酮ELISA試劑盒

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒葉下珠次素DL-絲氨 98%聚乙二三壬 90% active ingredients basis

小鼠Slit2 試劑盒 19,20-(E)-瓦來薩明肌氨酯鹽鹽 BR對羥苯 AR,99.0%

小鼠Slit2 試劑盒 山姜素DL-絲氨酯鹽鹽 98%二乙二二丁 99%

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 銀杏C17:1D-蘇氨 99%烯糠酯 95%

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 前胡素D-色氨酯鹽鹽 98%縮水甘油糠 96%

小鼠8羥脫氧鳥(8-OHdG)試劑盒 醉魚草皂甙IVD-酪氨 98%烯異酯 85-90%,含150-200 ppm MEHQ穩(wěn)定劑

小鼠8羥脫氧鳥(8-OHdG)試劑盒 鹽普羅托平; 鹽藍堇L-酪氨酯 98%二烯新戊二酯 90%

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 脫水羊藿素L-酪氨乙酯鹽鹽 98%三羥烷三烯酯 80%

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 去氫丹參新D-色氨 98%環(huán)烷羧 98%

小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 偽石蒜L-狀腺素  98%2,4-二羥苯 98%

小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 β-常春藤素L-色氨酯鹽鹽 98%2,4-二羥苯 ≥97%,Kosher

小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒苯酰新頭原鹽鹽L-狀腺素鈉 98%N-異苯 99%

小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒毛萼晶AD-纈氨 98%N-異苯 分析標準品

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒 脫氫樅DL-纈氨 98%間苯二 98%

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒 異牡荊黃素L-纈氨酯鹽鹽 99%2,4-二羥苯酯 98%

小鼠白介素7(IL-7)試劑盒 尾葉香茶菜戊素L-纈氨 97%鄰苯二 98%
AD乙胺碘呋酮ELISA試劑盒用途：

細胞學樣本常規(guī)染色，尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。

注意事項：

OG6與EA50或EA36聯(lián)合使用，可以將細胞漿染成鮮明的綠色、藍色、粉色。注意密閉干燥保存。

儲存條件：室溫，12個月