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旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒價格

產品簡介

旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒價格
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更新時間:2021-03-13
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Trichinella spp.PCR

 貨號

 LZP7405

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
β-DPN三(羥甲基)氨烷鹽酸鹽 99%Cbz-L-蘇氨酸芐酯 98%

β-DPNH三(羥甲基)氨烷鹽酸鹽 超純級N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯二環己胺鹽  98%

NADH Inhibitor用于分子生物學和細胞培養,≥99.0% (AT)叔丁氧羰?;涟彼岫h己胺鹽   ≥98.5%

TPNN-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-胺鈉鹽 99%N-Boc-L-亮氨  97%

TPNH2 Na4N-三(羥甲基)甲基-3-氨基磺酸 99%4-溴咪唑 97%

Coenzyme Q10N-三(羥甲基)甲基-3-氨基磺酸 ≥99.5% (T)(溴甲基)環丁烷 98%

COA用于細胞培養級, ≥99.5%(T)4-氯-3-乙酮 80%

3C protease八烷基*基氯化銨 99%2-氯-3-甲酸 99%

Lysing Enzymes2,4,6-三溴-3-羥基苯甲酸 98%2-(2-吡啶酮-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟酸鹽  99%

XylanaseN-三(羥甲基)甲氨基-2-羥基磺酸 99%3,5-二氯芐胺 97%

ASON-三(羥甲基)甲氨基-2-羥基磺酸 超純級D-2,4-二氨基丁酸 99%

Alcohol dehydrogenaseN-(3-磺基)-3,3',5,5'-四甲基聯苯胺鈉鹽 99%D-(-)-二乙酯 99%

Driselase三(羥甲基)甲基甘氨酸 for cell culture,≥99.5%(T) 2-氟-3-(三氟甲基)苯甲酸 98%

XODBiological stain,生化試劑級Fmoc-L-烯基甘氨酸 98%

SODBiological stain,生化試劑級4-氟-3-甲酸 98%

Thrombin溶性四氮唑-8 98%4-氟苯甲酰乙酸甲酯 98%

2-苯基苯酚(標準品)Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Nuclear Matrix Protein p84/NMP84   核基質p84蛋白抗體

正戊(分析標準品,≥99.8%(GC))Jak1 (E3A6M) Rabbit mAbNUCKS1  核酪蛋白激酶和細胞周期蛋白依賴性激酶底物1抗體

菲標準溶液(395μg/mL,基體:甲)Cyclin H AntibodyNUBP2  核苷酸結合蛋白2抗體

(標準品)Cyclin H AntibodyNUBP1  核苷酸結合蛋白1抗體

標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)DAPK3/ZIPK AntibodyNUAK2  SNF1/AMP激酶相關激酶2抗體

吡啶(標準品)EpCAM (VU1D9) Mouse mAbNTN3/Netrin-3  軸突生長誘導因子3抗體

3-氯聯苯(標準品)Phospho-PSD93 (Tyr340) AntibodyNtn1  軸突導向因子1抗體

4-氯聯苯(標準品)Bim (C34C5) Rabbit mAbNTF97/KPNB1  親核素β1抗體

2,2,5-三氯聯苯(標準品)Bim (C34C5) Rabbit mAbNTCP/SLC10A1  鈉離子/牛磺膽酸共轉運蛋白

2,2,5,5-四氯聯苯(標準品)Histone H2B (53H3) Mouse mAbNTAL  B淋巴細胞鏈接激活蛋白抗體
旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒價格4,4'-Dimethyl-2,2'-dipyridyl,99%通用試劑 1G

4-Acetylpyridine,97%通用試劑 5G

3-Acetylpyridine,98%通用試劑 25G

2-Acetylpyridine,≥99%通用試劑 25G

2-Vinylpyridine,97%通用試劑 25ML

5-Ethyl-2-pyridineethal,98%通用試劑 5G

4-Ethylpyridine,98%通用試劑 25ML

1-(2-Hydroxyethyl)piperidine,99%通用試劑 100G

Acridine hydrochloride,98%通用試劑 1G

Pyridine hydrochloride,≥98.0%通用試劑 25G

3-Picoline,99%通用試劑 100ML

4-Dimethylamipyridine, ≥99%通用試劑 25G

2,4-Lutidine,99%通用試劑 25ML

2,6-Lutidine,99%通用試劑 25ML

2,3-Lutidine,99%通用試劑 25ML

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