elisa試劑盒的主要檢測條件有哪些？

　　elisa試劑盒主要檢測條件如下：

　　1.elisa加樣

　　elisa一般有3次加樣步聚，即加標本→加酶結(jié)合物→加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝固、待其收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。

　　一般說來，5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。可用作elisa測定的標本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份，elisa試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留。

　　2.固相載體

　　加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。

　　好的儀器和準確的操縱是保證elisa試劑盒檢測結(jié)果正確可靠的必要條件。elisa頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標本可直接進行測定，有些則需經(jīng)預(yù)處理。

　　3.標本因素

　　血清標本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的elisa測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法elisa中可使本底加深。